Espaço de oração que fazia parte, como era habito na época, dos aposentos da Duquesa D.Ana, mãe do rei D.João IV.

O tecto, executado em 1602-3 pelo pintor Tomás Luis, é decorado com frescos de inspiração italiana que incluem elementos vegetalistas e figurações profanas, denominados brutescos, a par de representações de Santa Catarina e Santa Apolónia. Da mesma época uma série de pinturas sobre madeira de Frei Marcos da Cruz - cenas da Vida da Virgem - conjunto que adornou em tempos a Capela do Colégio dos Reis Magos, a escola de música que funcionou até 1834 em edificio adjacente ao Paço. Na parede que corresponderia ao altar está exposta uma pessoa tela do pintor francês Pierre Antoine Quillard (1701-1733), representando a Anunciação.